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相關蛋白1(FGL1)檢測ELISA試劑盒檢測原理:

點擊次數:1985 更新時間:2019-05-08

相關蛋白1(FGL1)檢測ELISA試劑盒檢測原理:

本試劑盒采用雙抗體夾心法:抗相關蛋白1(FGL1)單抗包被于酶標板上,標本和標準品中的纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)會與單抗結合,游離的成份被洗去。加入酶標抗體,抗相關蛋白1(FGL1)抗體與結合在單抗上的相關蛋白1(FGL1)結合而形成免疫復合物,游離的成分被洗去。加入顯色底物,若反應孔中有纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1),辣根過氧化物酶會使無色的顯色劑現藍色,加終止液變黃。在450nm處測OD值,纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)濃度與OD450值之間呈正比,可通過繪制標準曲線求出標本中的纖維蛋白原相關蛋白1(FGL1)濃度。

相關蛋白1(FGL1)檢測試劑盒樣品收集:

1. 血清:全血樣品于室溫放置2小時或4℃過夜后于1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測,收集血液的試管應為一次性的無熱原,無內毒素試管。

2. 血漿:抗凝劑使用EDTA-Na2,樣品采集后30分鐘內于1000×g離心15分鐘,取上清即可檢測。避免使用溶血,高血脂樣品。

3. 組織勻漿:用預冷的PBS (0.01M, pH=7.4)沖洗組織,去除殘留血液(勻漿中裂解的紅細胞會

影響測量結果),稱重后將碎。將剪碎的組織與對應體積的PBS(一般按1:9的重量體積比,比如1g的組織樣品對應9mL的PBS,具體體積可根據實驗需要適當調整,并做好記錄。在PBS中加入蛋白酶抑制劑)加入玻璃勻漿器中,于冰上充分研磨。為了進一步裂解組織細胞,可以對勻漿液進行超聲破碎,或反復凍融。zui后將勻漿液于5000×g離心5~10分鐘,取上清檢測。

4. 細胞培養上清:取細胞培養上清于1000×g離心20分鐘,除去雜質及細胞碎片。取上清檢測。

5. 其它生物樣品:1000×g離心20分鐘,取上清即可檢測

6. 樣品應清澈透明,懸浮物應離心去除。

7. 樣品收集后若在1周內進行檢測的可保存于4℃,若不能及時檢測,請按一次使用量分裝,凍存于-20℃(1個月內檢測),或-80℃(6個月內檢測),避免反復凍融。

8. 如果您的樣品中檢測物濃度高于標準品zui高值,請根據實際情況,做適當倍數稀釋(建議先做預實驗,以確定稀釋倍數)。

試驗所需自備物品:

1. 酶標儀(450nm波長濾光片)

2. 高精度移液器,EP管及一次性吸頭:0.5-10μL, 2-20μL, 20-200μL, 200-1000μL

3. 37℃恒溫箱,雙蒸水或去離子水

4. 吸水紙

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