綜合微生物的培養方法,包括以下步驟:
(1)前期準備:(A)滅菌處理;(B)制備Biolite水;(C)檢查設備和材料;
(2)按比例配制培養材料;
(3)導入曝氣,進行繁殖培養;
(4)取液觀察;(a)取液;(b)稀釋菌液;(c)平板培養;
(5)分離并檢測;
(6)取液儲存;通過該綜合微生物培養方法簡單可操作性強,培養的綜合微生物均在3代以內,菌類穩定不發生突變,且繁殖快速。
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規格參數:
產品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
冬蟲夏草(斜面)說明書 | Ophiocordy | EY-J963312 |
資源名稱: 冬蟲夏草(斜面)
種屬: Ophiocordyceps sinensis (Berk.) G.H. Sung J.M. Sung Hywel-Jones
提供形式: 斜面培養物
模式菌株: no
應用領域: 研究;教學。食藥用菌
培養基: 綜合PDA:馬鈴薯煮汁1000mL,二氫鉀 3g,鎂 1.5g,葡萄糖 20g,1 10mg,瓊脂 20g,pH自然,121℃,15min。
低溫存法:
①簡單保存法,將瓊脂斜面孢子培養物、菌絲懸浮液以及由麩皮、大米、小米等谷物原料制成的孢子培養物置于4℃冰箱保存,保存時間不超過1~2個月,若將谷物原料制備的孢子瓶抽真空并在棉塞上浸蠟,以隔絕外界空氣和水汽,保持時間可達3~4個月;②液氮超低溫保存法,將生長穩定期的細胞懸浮在10%甘油或其他低冰點液體中,密封于安瓿管內,然后控制冷卻速度,使安瓿管溫度逐步下降至 -35℃時,即可置于-150~-196℃的液氮罐中保存。大多數微生物如病毒、噬菌體、多種細菌、放線菌、酵母和原蟲、特別是一些用冷凍干燥法有困難的微生物,都可用此法保存。
微生物菌種的培養:
⒈ 孢子制備
⑴ 放線菌孢子的制備
一般采用瓊脂斜面培養基,培養基中含有一些適合產孢子的營養成分,如麩皮、豌豆浸汁、蛋白胨和一些無機鹽等。碳源和氮源不要太豐富(碳源約為1%,氮源不超過0.5%),碳源豐富容易造成酸性的營養環境,不利于放線菌孢子的形成,氮源豐富則有利于菌絲繁殖而不利于孢子形成。一般情況下,干燥和限制營養可直接或間接誘導孢子形成。放線菌斜面的培養溫度大多數為28 ℃,少數為37 ℃,培養時間為5~14天。
⑵ 霉菌孢子的制備
霉菌的孢子培養,一般以大米、小米、玉米、麩皮、麥粒等天然農產品為培養基。這是由于這些農產品中的營養成分較適合霉菌的孢子繁殖,而且這類培養基的表面積較大,可獲得大量的孢子。霉菌的培養一般為25~28 ℃,培養時間為4~14天。
⒉ 種子制備
⑴ 搖瓶種子制備
搖瓶種子進罐,常采用母瓶、子瓶兩級培養,有時母瓶種子也可以直接進罐。種子培養基要求比較豐富和*,并易被菌體分解利用,氮源豐富有利于菌絲生長。原則上各種營養成分不宜過濃,子瓶培養基濃度比母瓶略高,更接近種子罐的培養基配方。
⑵ 種子罐種子制備
種子罐種子制備的工藝過程,因菌種不同而異,一般可分為一級種子、二級種子和三級種子的制備。孢子(或搖瓶菌絲)被接入到體積較小的種子罐中,經培養后形成大量的菌絲,這樣的種子稱為一級種子,把一級種子轉入發酵罐內發酵,稱為二級發酵。如果將一級種子接入體積較大的種子罐內,經過培養形成更多的菌絲,這樣制備的種子稱為二級種子,將二級種子轉入發酵罐內發酵,稱為三級發酵。同樣道理,使用三級種子的發酵,稱為四級發酵。
Burkholderia vietnamiensis 中文名稱:越南伯克霍爾德氏菌Burkholderia vietnamiensis提供形式:凍干安全等級:1模式菌株:no培養方法培養基:33或109生長條件:30℃ 純度:98%
Kurthiasibirica 中文名稱:西伯利亞庫特氏菌Kurthiasibirica安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:107生長條件:25℃ 純度:97%
Viridibacillusarenosi 中文名稱:ViridibacillusarenosiViridibacillusarenosi分離基物:土壤,荷蘭安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:110生長條件:30℃ 純度:97%
Rummeliibacillusstabekisii 中文名稱:RummeliibacillusstabekisiiRummeliibacillusstabekisii安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:2生長條件:30℃ 純度:97%
Acidovorax│facilis 中文名稱:敏捷食菌Acidovorax│facilis提供形式:凍干物安全等級:1模式菌株:yes培養方法培養基:A2生長條件:30℃存儲條件:-80℃冰箱凍結法;真空冷凍干燥法 純度:CP,98%
Pseudomonasluola 中文名稱:PseudomonasluolaPseudomonasluola分離基物:人類傷口安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:104生長條件:30℃ 純度:指示劑級
Thalassospirapermensis 中文名稱:ThalassospirapermensisThalassospirapermensis分離基物:鹽礦附近的污染土壤安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:102生長條件:30℃ 純度:指示劑級
Maritimibacralkaliphilus 中文名稱:MaritimibacralkaliphilusMaritimibacralkaliphilus分離基物:海,大西洋安全等級:1模式菌株:yes應用領域:模式菌株:培養方法培養基:102生長條件:30℃ 純度:≥99%
冬蟲夏草(斜面)說明書50260人支氣管上皮細胞微小RNA3--2,4-二氟苯甲DYKDDDDK Tag(CT)/Flag-Tag 標簽DYKDDDDK Tag分支肽
50270人氣管上皮細胞微小RNA3--2,4-二氟苯甲T7 tag(recombinant T7-tagged proteins) T7 tag標簽抗原
50240人小氣道上皮細胞微小RNA炔胺鹽鹽V5 tag(recombinant V5-tagged protein) V5 tag多肽抗原
酵母提取(膏)人肺成纖維細胞微小RNA炔胺鹽鹽KT3 tag KT3 tag標簽抗原
50090人支氣管平滑肌細胞微小RNA環磺酰胺VSV-G tag(vesicular stomatitis virus glycoprotein) VSV-G tag標簽抗原
50092人氣管平滑肌細胞微小RNA環磺酰胺HLA-DR(human leukoyte Antigen DR) HLA-DR抗原
50093人骨骼肌細胞微小RNAHLA-E 人類白細胞抗原E
50094人骨骼肌衛星細胞微小RNAAnti-HMGA1 (high mobility group AT-hook 1) 高遷移率族蛋白A1抗原